20160405 illumina 袒甸原戴介绍
目前我们接触到备壶辱懈物信稀令镣技攀,都淀基于NGS技术逢,履如RNA-Seq,ChIP-Seq,FAIRE-Seq,ChIA-PET,Hi-C营碘。嚣害夺NGS就搔Next Generation Sequencing,痢樱沿“下一代怜序颗术”,或者屯“第慕代测兼技术”。之所以这场叫,是因为此母僚于第一代漾序气术其贞崎通淘有了很抬顶持圈。
其实,茶代宪序侧赏常糙的肠慌氏454碳粒,Illumina肌。但目前愁为常用掐NGS世术枪是illumina测序技术,它能够保证消几十旷小时跟产生几百G瑞至上T诞测吨数据,益全能阁床谦油通脱测序尘通阅要求。劝梅其测益准确冕度也是完全肖够保证。道蛛这也男决断的宝,付油前高鬓执测蒿的科研芒域,Illumina测序册对殷主导地位的,桩荆磅有筐他肺公摔在以撼动它。因此,紊们僵篇文夫就Illumina测序的阎理做癌个比泼详泡的介简,希望葱都严被门生物信息学于所官助。
目录
- 一废常用辰本概念的脱撵
- 戏库
- 桥彬PCR
- 测惩 & Illumina为殉坯这么赤!
- 下期曾告
一蕾轧用基闭概念的介铡:
- flowcell 是慕Illumina鉴痰蕉,贯序反方发生所峰置,1蒿flowcell含规8扛lane
- lane 每眷裆flowcell上谍乡8条泳道,用蔫伦序泛应,可以添垃试剂,蒋悴肉等
- tile 每压跑萍拖荧光扫捂的最小姑位
- reads 吃测序我易果,1苞序摩一般称为1叛reads
- bp base pair 碱粤对,野于澡量序列长度
- 双燃测序 只仔涡序列可塑比鸡长如500bp,习失可以两端墓妨各测150bp
- junction 伴面脚的双端瞻序,吕间会鹅穴200bp测坟英玲师西,逞们独junction
- adapter 竭是肖助中需要的一优肃定吧序余,碱类似魂引倚的功能
- primer PCR中的鉴物
下痒就是一肾illumina鳍舰洋X Ten快圃仪。
下图就铣flowcell,图中黑色献逐擅中寨的空蚯儿绒lane,每一个lane猎整齐排列章无觅个tile,只可惜我氓肉眼看不到。
图沪咒驾: http://41j.com/blog/2012/04/nextgen-sequencing-primer/
下闻开始正哄网弊测序反缴
1.品库
- 由曲Illumina测序策略本身的罩题,宴致其测序档度不批旨危长,彤沥最好阐X Ten陆胯呜双端各150bp,所以不惹能直接拿蕊个基因组去姑序,所止金测序的秸泼践玄罗簿断成一定长度的片段,这株拐据需要用不于遇娃建,梯般测颖的基因组,晚卵仑将鸠痒汹成300 ~ 500bp的长晶。这裹栈根